Гистохимическое выявление полисахаридов. Приготовление реактива Шиффа и проведение шик-реакции
(Н. Schiff, 1834-1915, немецкий биохимик)
реактив для качественного определения альдегидной группы органических веществ, представляющий собой раствор фуксинсернистой кислоты; используется для гистохимического выявления углеводов и дезоксирибонуклеиновой кислоты.
Смотреть значение Ши́ффа Реакти́в в других словарях
Реактив М.
— 1. Вещество, применяемое для проведения химической реакции.
Толковый словарь Ефремовой
Реактив
— реактива, м. (от латин. приставки re - обратно и activus - действенный) (хим.). Вещество, присоединение к-рого к другому веществу вызывает определенную химическую реакцию и тем........
Толковый словарь Ушакова
Реактив
— -а; м. [от лат. re - противо и activus - действенный] Хим. Вещество точно определённого состава и степени чистоты, применяемое для проведения химической реакции. Химический........
Толковый словарь Кузнецова
Бенедикта Реактив
— (S. R. Benedict, 1884-1936, амер. биохимик) реактив для обнаружения глюкозы в моче, представляющий собой водный раствор сернокислой меди, лимоннокислого натрия (или калия) и углекислого натрия.
Большой медицинский словарь
Гюнцбурга Реактив
— (А. О. Gunzburg, род. в 1861 г., нем. врач) реактив, содержащий флороглюцин, ванилин и спирт, применяемый при качественном определении соляной кислоты в желудочном соке.
Большой медицинский словарь
Реактив
— (реагент), вещество, участвующее в химической реакции. Термин часто используют для обозначения стандартного лабораторного реактива, то есть вещества, используемого........
Научно-технический энциклопедический словарь
Стшизовского Реактив
— (С. Strzyzowski, род. в 1868 г., швейц. биохимик) смесь этилового спирта, ледяной уксусной и йодисто-водородной кислот, применяемая в судебной медицине для обнаружения крови в........
Большой медицинский словарь
Сульковича Реактив
— (Н. W. Sulkowitch, род. в 1906 г., амер. уролог) реактив, содержащий по 2,5 г щавелевой кислоты, оксалата аммония и ледяной уксусной кислоты на 150 мл их водного раствора; используется........
Большой медицинский словарь
Феллинга Реактив
— (I. A. Folling; син. феллингова жидкость) реактив для качественного и количественного определения альдегидов, простейших редуцирующих сахаров и некоторых других веществ........
Большой медицинский словарь
Фолина-чокалтеу Реактив
— (О. К. О. Folin, 1867-1934, шведский физиолог и химик; V. Ciocalteu, 1890-1947, румынский врач и биохимик) смесь растворов вольфрамовокислого и молибденовокислого натрия, к которой добавляют........
Большой медицинский словарь
Шиффа Реактив
— (Н. Schiff, 1834-1915, нем. биохимик) реактив для качественного определения альдегидной группы органических веществ, представляющий собой раствор фуксинсернистой кислоты;........
Большой медицинский словарь
Реактив Шиффа
— (Schiffs reagent) - водный раствор фуксина, обесцвеченный диоксидом серы. В присутствии альдегидов этот раствор окрашивается в синий цвет.
Психологическая энциклопедия
Реактив Шиффа (schiff"s Reagent)
— водный раствор фуксина, обесцвеченный диоксидом серы. В присутствии альдегидов этот раствор окрашивается в синий цвет.
Медицинский словарь
(Н. Schiff, 1834-1915, немецкий биохимик)
реактив для качественного определения альдегидной группы органических веществ, представляющий собой раствор фуксинсернистой кислоты; используется для гистохимического выявления углеводов и дезоксирибонуклеиновой кислоты.
- - реактив для обнаружения глюкозы в моче, представляющий собой водный раствор сернокислой меди, лимоннокислого натрия и углекислого натрия...
- - реактив, содержащий флороглюцин, ванилин и спирт, применяемый при качественном определении соляной кислоты в желудочном...
Медицинская энциклопедия
- - смесь этилового спирта, ледяной уксусной и йодисто-водородной кислот, применяемая в судебной медицине для обнаружения крови в пятнах...
Медицинская энциклопедия
- - реактив, содержащий по 2,5 г щавелевой кислоты, оксалата аммония и ледяной уксусной кислоты на 150 мл их водного раствора...
Медицинская энциклопедия
- - реактив для качественного и количественного определения альдегидов, простейших редуцирующих сахаров и некоторых других веществ в биологических жидкостях...
Медицинская энциклопедия
- - смесь растворов вольфрамовокислого и молибденовокислого натрия, к которой добавляют последовательно фосфорную, соляную кислоту и, после кипячения, сульфат лития, а также несколько капель бромной воды...
Медицинская энциклопедия
- - а, м. хим. Вещество, вызывающее определенную характерную реакцию в соединении с другим веществом и тем самым позволяющее обнаружить наличие последнего в данном составе...
Малый академический словарь
- - ...
Русское словесное ударение
"Ши́ффа реакти́в" в книгах
Тест № 2.
автора Хакамада Ирина МицуовнаТест № 2. Искусство обмана заключается в соблюдении пропорции между правдой и ложью. Пять капель на стакан. Тогда ложь легко проглатывается и хорошо усваивается. Политик должен уметь адсорбировать реальность от вымысла, чтобы выявить мотив и источник. Сейчас я расскажу
Тест № 3
Из книги SEX в большой политике. Самоучитель self-made woman автора Хакамада Ирина МицуовнаТест № 3 На чем нельзя экономить во время предвыборной кампании?1. На агитплакатах и листовках.2. На прессе и телевидении.3. На разведке.4. На публичных мероприятиях.Правильный ответ: безусловно, на разведке. Ею надо заниматься на протяжении всей кампании. Чтобы в
Тест № 2.
Из книги SEX в большой политике. Самоучитель self-made woman автора Хакамада Ирина МицуовнаТест № 2. На высокопоставленном приеме вам возле второго блюда поставили большую фарфоровую плошку с прозрачной жидкостью и долькой лимона. Что это и как с этим поступить?1. Это чай, значит, его надо выпить.2. Это вода для ополаскивания рук, значит, их надо сполоснуть.3. Это
Тест № 2
Из книги SEX в большой политике. Самоучитель self-made woman автора Хакамада Ирина МицуовнаТест № 2 Вы пришли в чиновный кабинет, чтобы подписать важную для вас бумагу. И вдруг хозяин кабинета запирает на ключ дверь, валит вас на диван и, обваривая лицо гипертоническим дыханием, предлагает в обмен на свой автограф вступить с ним в половую связь. Как вы
Тест
Из книги Кулинарная книга Золушки автора Вакса ОльгаТЕСТ
Из книги Игра как феномен культуры автора Гузик М. А.ТЕСТ Тест представляет собой увлекательную и познавательную игру и является эффективной формой проверки знаний по самым различным проблемам. Тесты, предложенные студентам, составлены на основе лекционного материала и самостоятельной работы по дисциплине «Игра как
Тест
Из книги Ближнее море автора Андреева ЮлияТест Внезапно отвлекла от ноутбука незнакомая девочка лет девяти. То ли тихо подошла, то ли я, как обычно, погрузилась в текст настолько, что ничего не видела и не слышала.Я на улице, в парке санатория «Заря» под Питером. Ага, место установлено. Хотя адекватное восприятие
Тест
Из книги Основы логистики автора Левкин Григорий ГригорьевичТест 1. С точки зрения логистического подхода объектом управления на макроуровне является:а) служба сбыта;б) служба снабжения;в) сквозной материальный поток.2. Логистика пришла в экономику из сферы:а) строительства;б) медицины;в) военного дела;г) торгового
5.3.1. Сокращённый этап набора – тест, тест, тест…
Из книги Пособие начинающему капиталисту. 84 шага к успеху автора Химич Николай Васильевич5.3.1. Сокращённый этап набора – тест, тест, тест… Одним из методов набора людей является сокращенный этап набора методом тестирования. Суть его заключается в том, что при обращении к вам подходящего соискателя просите его выполнить тестовые задания. Желательно это
Что станет с тест-директором и тест-менеджером
Из книги Как тестируют в Google автора Уиттакер ДжеймсЧто станет с тест-директором и тест-менеджером Как все эти ролевые изменения отразятся на менеджерах, директорах и вице-президентах по тестированию? Их станет меньше. Те из них, у кого есть технические знания, перейдут на другие роли, более подходящие их инженерной
2.4. Выработка активной позиции. Тест 3. Насколько хорошо я умею общаться с людьми? Тест 4. Насколько я сильный лидер?
автора Азарова Ольга Николаевна2.4. Выработка активной позиции. Тест 3. Насколько хорошо я умею общаться с людьми? Тест 4. Насколько я сильный лидер? Все тростники в зарослях одинаковы видом, Но из одного тростника получается сахар, А из другого – только циновка. Джавахир аль-Асмар ТЕСТ 3. Насколько хорошо я
3.3. Общая атмосфера переговоров. Дискуссия, убеждение, выработка компромисса. Обратная связь. ТЕСТ 5. Как я умею говорить? ТЕСТ 6. Как я умею слушать?
Из книги Маленькие хитрости большого бизнеса автора Азарова Ольга Николаевна3.3. Общая атмосфера переговоров. Дискуссия, убеждение, выработка компромисса. Обратная связь. ТЕСТ 5. Как я умею говорить? ТЕСТ 6. Как я умею слушать? Золотое правило: Важно не то, что я сказал, а то, что другие услышали. Общая атмосфера переговоров. Помимо специальной и
Тест № 9 Тест СПИЛБЕРГЕРА-ХАНИНА. ОЦЕНКА ЭМОЦИОНАЛЬНОГО СОСТОЯНИЯ (УРОВЕНЬ РЕАКТИВНОЙ И ЛИЧНОЙ ТРЕВОЖНОСТИ)
Из книги Деловая психология автора Морозов Александр ВладимировичТест № 9 Тест СПИЛБЕРГЕРА-ХАНИНА. ОЦЕНКА ЭМОЦИОНАЛЬНОГО СОСТОЯНИЯ (УРОВЕНЬ РЕАКТИВНОЙ И ЛИЧНОЙ ТРЕВОЖНОСТИ) С помощью данного теста определяется уровень тревожности на момент его выполнения (РТ), отражающий реакцию на кратковременную сиюминутную ситуацию и уровень
Тест ВМ (ориентировочный тест школьной зрелости - вербальное мышление)
Из книги Плохие привычки хороших детей автора Баркан Алла ИсааковнаТест ВМ (ориентировочный тест школьной зрелости - вербальное мышление) И. ИразекКакое животное больше - лошадь или собака? Лошадь = 0, неправильный ответ = -5.Утром мы завтракаем, а в полдень...?Обедаем. Мы едим суп, макароны и мясо = 0.Полдничаем, ужинаем, спим и др. неправильные
Тест на кинестетическом уровне, или К-Тест
Из книги Пикап. Самоучитель по соблазнению автора Богачев Филипп ОлеговичТест на кинестетическом уровне, или К-Тест Журналы для мужчин не дают много советов по части секса, так как мужчины думают: "Я и так знаю, что делать. Просто дайте мне голую бабу!" Джерри Сайнфельд. Вот представь себе, что ты уехал далеко от своего дома, скажем, километров за
Метод Шифф - йодная кислота
Метод Шифф — йодная кислота применяется для выявления гликогена и нейтральных МПС. Наиболее распространена модификация Хочкисса и МакМануса.
Фиксация и способы приготовления срезов различны. Срезы из дистиллированной воды переносят на 15 мин в раствор нерйодата натрия или калия (350 мг перйодата калия или натрия + 50 мл дистиллированной воды + 0,5 мл 35% азотной кислоты), затем быстро ополаскивают в двух порциях дистиллированной воды и помещают на 5 мин в раствор сернистой воды (1,5 г метабисульфита натрия + 300 мл дистиллированной воды + 15 мл 1 и раствора соляной кислоты). После этого переносят в реактив Шиффа на 30 — 60 мин и снова в сернистую воду (три порции по 5 мин в каждой).
Затем выдерживают в дистиллированной воде до покраснения срезов, докрашивают ядра гематоксилином Эрлиха, разведенным до цвета мадеры, в течение 5 мин н промывают в водопроводной воде до посинения срезов.
Ополаскивают дистиллированной водой, проводят через спирты восходящей концентрации (70, 96, 100%), просветляют в ксилоле в течение 10 — 12 ч, заключают в канадский бальзам. Для идентификации гликогена и нейтральных МПС контрольные срезы перед окраской обрабатывают амилазой слюны или диастазой, затем красят, как указано выше.
Приготовление раствора Шиффа
1 г основного фуксина, растертого в ступке, помещают в 200 мл кипящей дистиллированной воды, встряхивают в течение 5 мин, охлаждают до 50 °С, фильтруют, добавляют вначале 20 мл 1 н. раствора хлористоводородной (соляной) кислоты, охлаждают до 25 °С, затем 1 г метабисульфата натрия или калия.
Оставляют в темноте на 14 — 24 ч, затем добавляют 2 г активированного угля, встряхивают в течение 1 мин, снова фильтруют и ставят в холодильник. Раствор должен быть бесцветным. Сернистую воду и перйодат калия или натрия рекомендуется готовить непосредственно перед употреблением.
«Патоморфологическая диагностика заболеваний кожи»,
Г.М.Цветкова, В.К.Мордовцев
Фиксация различная. Парафиновые срезы на сутки помещают в 3% раствор перекиси водорода, затем на 15 — 20 мин в карболовый гематоксилин (гематоксилин 1,75 г + 200 мл дистиллированной воды + 5 г кристаллической карболовой кислоты + 10 мл 10% фосфорно-вольфрамовой кислоты), ополаскивают дистиллированной водой, дифференцируют в 10% растворе фосфорно-вольфрамовой кислоты (до 1 сут), несколько часов…
Измельченные кусочки подвергаются предварительной фиксации в 4% глютаральдегиде, забуференном 0,1 М какодилатным буфером (рН 7,3) в течение 2 ч при температуре 4 °С. Хорошие результаты дает также применение 0,1 М фосфатного буфера (рН 7,3). Затем кусочки промывают в 0,2 М растворе сахарозы па какодилатном буфере в течение 12 ч и фиксируют в течение 2 ч…
Фиксация особенного значения не имеет, срезы можно приготовить на замораживающем микротоме, а также после заливки в парафин. Перед окрашиванием их помещают в изотонический раствор хлорида натрия на 3 ч при температуре 37 °С, затем переносят в 0,5% раствор толуидинового синего на 18 ч. После этого срезы быстро промывают в трижды сменяемой дистиллированной воде, высушивают фильтровальной…
Биопсию кожи лучше производить циркулярным полном, который значительно упрощает взятие материала и не травмирует прилежащие участки. Для постановки патологоанатомического диагноза большое значение имеют правильная фиксация и последующая обработка биопсированного кусочка кожи. Лучшим фиксатором для обычных гистологических целей является 10% нейтральный формалин. Его количество должно превышать в 50 раз объем биоптата. Так, биоптат размером 1 X…
Гистохимические методы исследования в основном применяются для научных целей, однако некоторые из них имеют диагностическое значение, как, на пример, ШИК-реакция, окраска альциановым голубым или толуидиновым синим, азаном по методу Гейденгайна и др. С помощью ШИК-реакции выявляют полисахариды: гликоген и муконолисахариды (МПС), особенно нейтральные. Эта реакция необходима для определения ШИК-положительных фибриноида и фибрина. Грибы и хитиновые…
ШИФФА РЕАКТИВ
Водный р-р фуксинсернистой к-ты (ф-лы I или II). Служит для качественного обнаружения альдегидов. При взаимод. Ш. р. с альдегидом RCHO образуется пурпурно-фиолетовый краситель (ф-ла III).
Р-ция очень чувствительна (напр., можно определить 1 мкг формальдегида). В то же время ароматич. гидроксиальдегиды, многие непредельные не дают окрашивание. Нек-рые (напр., ), непредельные соед., неорг. и орг. основания, ряд солей, способных к гидролизу, и все соед., окисляющие сернистую к-ту, приводят к образованию розовой окраски. Поэтому появление светло-розовой окраски нельзя считать положит. пробой на альдегид.
Ш. р. получают пропусканием SO 2 в 0,025%-ный водный р-р фуксина до обесцвечивания. При определении альдегидных групп необходимо предварит. довести кислотность до рН 3 путем добавления в Ш. р. к-ты или буферной смеси. Обычно проводят контрольный опыт. При нагр. р-р фуксин-сернистой к-ты может краснеть.
Р-ция, лежащая в основе использования Ш. р., открыта Г. Шиффом в 1864.
Лит.: Губен- Вейль, Методы органической химии, пер. с нем., 4 изд., т. 2. Методы анализа, М., 1963, с. 431-32; Идентификация органических соединений, пер. с англ., М., 1983, с. 195-96; Мазор Л., Методы органического анализа, пер. с англ., М., 1986, с. 122-24.
Я. А . Куцева.
Химическая энциклопедия. - М.: Советская энциклопедия . Под ред. И. Л. Кнунянца . 1988 .
Смотреть что такое "ШИФФА РЕАКТИВ" в других словарях:
- (H. Schiff; синоним фуксинсернистая кислота) реактив для качественного определения альдегидной группы органических соединений, открытый Хуго Шиффом. Содержание 1 Получение 2 Хранение … Википедия
- (Н. Schiff, 1834 1915, нем. биохимик) реактив для качественного определения альдегидной группы органических веществ, представляющий собой раствор фуксинсернистой кислоты; используется для гистохимического выявления углеводов и… … Большой медицинский словарь
реактив Шиффа - фуксинсернистая кислота Реактив, предназначенный для качественного определения альдегидных групп; применяется в реакции Фельгена при выявлении ДНК, а также в ряде др. тестов (на гликоген и др.). [Арефьев В.А., Лисовенко Л.А. Англо русский… … Справочник технического переводчика
Schiff’s reagent реактив Шиффа, фуксинсернистая кислота. Pеактив, предназначенный для качественного определения альдегидных групп; применяется в реакции Фельгена
Водный раствор фуксина, обесцвеченный диоксидом серы. В присутствии альдегидов этот раствор окрашивается в синий цвет.
Полисахариды - высокомолекулярные сахара, встречающиеся в тканях организма как в чистом виде (гликоген), так и в соединении с другими веществами (гликопротеиды, протеогликаны).
Наиболее распространенными методами выявления полисахаридов являются: окраска объектов кармином по Бесту и ШИК-реакция.
1. Выявление кармином по методу Беста - эмпирический способ и не отвечает строгим гистохимическим требованиям. Он широко распространен в гистохимической практике благодаря доступности и яркости. Метод основан на окраске срезов, залитых в парафин или целлоидин, водным раствором кармина. В результате гликоген окрашивается в ярко-красный цвет. При окраске кармином кроме гликогена могут окрашиваться некоторые клеточные гранулы, слизь, кутикулярные каемки эпителия и др. Поэтому всегда следует ставить контроль с диастазой.
2. ШИК - реакция (ШИФФ-йодная кислота). Метод основан на том, что периодат калия при воздействии на полисахариды избирательно окисляет спиртовые группы углеродных атомов гексозной части, превращая их в альдегидные. Свободные альдегидные группы затем реагируют с фуксин-сернистой кислотой, давая фиолетово-вишневое окрашивание.
Приготовление растворов:
1. Реактив Шиффа (фуксинсернистая кислота. 1 г основного фуксина растворяют в 200 мл дистиллированной воды (комнатной температуры), тщательно взбалтывая в течение 3-5 мин. Раствор фильтруют через бумажный фильтр. К фильтрату добавляют 10 мл 1 н. хлористоводородной кислоты и 1 г метабисульфита калия или натрия. Раствор в хорошо закрытой колбе помещают в темное место на 24 ч. После обесцвечивания фуксина реактив приобретает желтоватый или коричневый цвет в зависимости от качества основного фуксина. Для окончательной очистки фуксина от примесей добавляют к нему 3-5 растолченных таблеток активированного угля, хорошо взбалтывают и отфильтровывают в склянку с притертой пробкой. Реактив лучше хранить в холодильнике. С целью проверки качества полученного реактива Шиффа наливают в бюкс 5 мл реактива и добавляют в него 1 каплю неразведенного кислого формалина. Если реактив отличного качества, то он на глазах приобретает цвет основного фуксина.
2. Сернистая вода. К 200 мл дистиллированной воды добавляют 10 мл 10% раствора гидросульфита натрия (Na2SO3) и 10 мл 1 н. раствора хлористоводородной кислоты. Сернистая вода готовится перед употреблением и должна обладать характерным запахом диоксида серы (сернистого ангидрида (SO2).
Методика проведения окраски препаратов:
1. Материал фиксируют в 10 % формалине, жидкостях Карнуа, Ценкера, заливают в парафин.
2. Депарафинированные срезы доводят до дистиллированной воды.
3. При комнатной температуре срезы окисляют 0,5-1 % водным перийодатом калия в течение 2 -10 мин. Раствор хранят в темноте. Рабочую концентрацию этого раствора и продолжительность инкубации в ней подбирают в зависимости от объекта.
4. Промывают в дистиллированной воде 10 мин.
5. Помещают срезы в реактив Шиффа на 10-30 мин при комнатной температуре в темноте.
6. Срезы промывают сернистой водой три раза по 2 мин. Сернистую воду можно также готовить (непосредственно до проведения реакции).
7. Тщательно промывают в проточной и дистиллированной воде, ядра можно докрасить 0,5 % светлым зеленым или гематоксилином.
8. Обезвоживают в спиртах возрастающей концентрации, заключают в бальзам.
Результат: углеводы, содержащие гексозу, окрашиваются в красно-лиловый цвет, гликоген - в более интенсивный темно-красный.
Контроль: расщепление гликогена амилазой или диастазой, реакция ацетилирования для блокирования гидроксильных групп.
Необходимо пользоваться химически чистой посудой, стеклянными палочками; нельзя работать с металлическими крючками или иголками; окрашивание срезов в реактиве Шиффа следует проводить в темноте.
При обильном выявлении ШИК-позитивного вещества цитоплазма клеток гомогенно окрашивается в фиолетово-вишневый цвет.